Long ssDNA制備試劑盒（LsODN制備試劑盒）為生成長的單鏈DNA（1,500堿基或3,000堿基）提供了一種簡單易行的方法。通過該方法制備的長ssDNA具有確定的序列和長度，因為它不包括由PCR引起的內(nèi)部突變和末端缺失，核酸外切酶副反應，不是高保真逆轉(zhuǎn)錄酶反應或不是高保真合成寡核苷酸。
該方法的步驟與獲得dsDNA片段的方法幾乎相同。將目的DNA克隆到質(zhì)粒中。用一對兩個切口核酸內(nèi)切酶或切口內(nèi)切核酸酶和限制酶的組合消化所得的含有DNA的質(zhì)粒。通過與變性凝膠 - 上樣緩沖液混合使帶切口的質(zhì)粒變性，然后進行瓊脂糖凝膠電泳。切除對應于長ssDNA的條帶并用市售試劑盒提取。

可以制備長ssDNA（在1,500堿基內(nèi)或在3,000堿基內(nèi)）。 

長ssDNA定義了序列和長度。

原理簡單，程序簡單。

高產(chǎn)量和高品質(zhì)。 

質(zhì)粒圖


原理


1.使用一對兩個切口核酸內(nèi)切酶位點或切口核酸內(nèi)切酶位點和限制酶位點
2的組合將感興趣的DNA克隆到質(zhì)粒中。用一對切口消化得到的帶有DNA的質(zhì)粒。核酸內(nèi)切酶或核酸內(nèi)切酶切口的組合和限制性內(nèi)切酶
3.變性凝膠上樣緩沖液（DS611），然后進行瓊脂糖凝膠電泳帶切口的質(zhì)粒變性使用
4對應于一個長的ssDNA的頻帶被切出，并萃取。 

通過該試劑盒制備的長ssDNA

在Nt.Bsp QI和Nb之間克隆目標的1.5kb DNA片段。pLSODN-1的Bsr DI位點。類似地，在Nt.Bsp QI和Nb之間克隆目標3.0kb的DNA片段。pLSODN-3的Bsr DI位點。
用Nt.Bsp QI和Nb消化所得質(zhì)粒。Bsr DI。
將雙切口質(zhì)粒與變性凝膠 - 上樣緩沖液（DS611）混合并加熱，然后加載到常規(guī)的非變性瓊脂糖凝膠電泳中。
切除對應于長ssDNA的條帶并提取。 
 
泳道：1含有1,500 bp DNA片段的雙切口pLSODN-1 
泳道：2純化的長ssDNA（1,500堿基）
泳道：3含有3,000 bp DNA片段的雙切口pLSODN-3 
泳道：2純化的長ssDNA（3,000堿基） 


使用該產(chǎn)品的
原稿ssODN介導的敲入CRISPR-Cas用于受精卵中的大基因組區(qū)域。Yoshimi K，Kunihiro Y，Kaneko T，Nagahora H，Voigt B，Mashimo T.（2016）Nature Communications。20; 7：10431。

碼

產(chǎn)品名稱

尺寸

DS610

用于1.5 Kb的長ssDNA制備試劑盒
（LsODN制備試劑盒）

pLSODN-1
10微克（0.5微克/微升）
pLSODN-2D
10微克（0.5微克/微升）
變性凝膠上樣緩沖液
1毫升（100個負載）
DynaMarker®Prestain標記為RNA高
90微升（18個負載）

DS620

用于3.0 Kb的長ssDNA制備試劑盒
（LsODN制備試劑盒）

pLSODN-310μg
（0.5μg/μl）
pLSODN-4D10μg
（0.5μg/μl）
變性凝膠加載緩沖液
1 ml（100次加載）
DynaMarker®PrestainMarker for RNA High90μl
（18次加載）

DS611

變性凝膠加載緩沖液

變性凝膠加載緩沖液
1 ml x 5（500次加載）

DNA Size Marker

DM112

DynaMarker® DNA Low D

DM122

DynaMarker® DNA High D

DM132

DynaMarker® for Plasmid D

DM100

DynaMarker® DNA Small

DM310

λHind III Marker

DNA Loading Dye

DM210

6×BPB Loading Dye

New Type Colored Size Molecular Weight Marker

DM253

DynaMarker® Prestain Marker for Small RNA Plus

DM260

DynaMarker® Prestain Marker for RNA High

DM270

DynaMarker® DIG Labeled Blue Color Marker for Small RNA

RNA Size Marker

DM152

DynaMarker® RNA Low II

DM157

DynaMarker® RNA Low II Easy Load

DM160

DynaMarker® RNA High

DM170

DynaMarker® RNA High for Easy Electrophoresis

DM180

DynaMarker® dsRNA

DM185

DynaMarker® dsRNA Easy Load

DM192

DynaMarker® Small RNA II

DM197

DynaMarker® Small RNA II Easy Load

Protein Size Marker

DM610

DynaMarker® Protein Eco

DM625

DynaMarker® Protein BlueRed

DM637

DynaMarker® Protein MultiColor III

DM660

DynaMarker® Protein MultiColor Stable

DM670

DynaMarker® Protein MultiColor Stable, Low Range

DynaZyme

DE110

Alkaline Phosphatase

from psychrophilic bacterium

DynaExpress

DS610

Long ssDNA Preparation Kit

DS620

DP100

ProteinChecker

DS500

QuickBlue Staining Solution

Other reagents for molecular biology

DR110

DEPC-treated Water, 1 ml Χ 5

DR115

DEPC-treated Water, 50 ml Χ 2

DR117

DEPC-treated Water, 500 ml

DR120

RNase-free Water, non DEPC, 1 ml Χ 5

DR125

RNase-free Water, non DEPC, 50 ml Χ 2

DR127

RNase-free Water, non DEPC, 500 ml

F012

DNA, Salmon Sperm, Sonicated

F008

Anti-6 × Histidine Antibody