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cytoskeleton BK165-S說明書

更新時間:2019-02-18      點擊次數(shù):1482

 

cytoskeleton BK165-S說明書

新的Signal-Seeker™:PTM檢測試劑盒,抗體和試劑

簡單 

全面的套件可大限度地縮短優(yōu)化時間,同時大化PTM檢測

質(zhì)量

的靈敏度和度,可以自信地識別低豐度的PTM

積分

使用相同的系統(tǒng)研究多個PTM

 

Signal-Seeker™SUMOylation 1檢測試劑盒
(10次檢測)

BK165-S

Signal-Seeker™SUMOylation 1檢測試劑盒
(30種檢測)

BK165

Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒
(10次檢測)

BK163-S

Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒
(30種檢測)

BK163

Signal-Seeker™磷酸酪氨酸檢測試劑盒
(10種檢測)

BK160-S

Signal-Seeker™磷酸酪氨酸檢測試劑盒
(30種檢測)

BK160

Signal-Seeker™SUMOylation 2/3檢測試劑盒
(10種檢測)

BK162-S

Signal-Seeker™SUMOylation 2/3檢測試劑盒
(30種檢測)

BK162

Signal-Seeker™泛素化檢測試劑盒
(10種檢測)

BK161-S

Signal-Seeker™泛素化檢測試劑盒
(30種檢測)

BK161

 

 

 

新的Signal-Seeker™SUMOylation 1檢測試劑盒(10種檢測)

10種檢測方法(Cat。#BK165-S)

Signal-Seeker™系列產(chǎn)品的開發(fā)旨在簡化專家和非專業(yè)人士對關(guān)鍵調(diào)節(jié)蛋白修飾的分析。全面的Signal-Seeker™試劑盒提供親和珠系統(tǒng),可從任何給定的細(xì)胞或組織裂解液中分離和富集修飾的蛋白質(zhì)。然后使用針對靶蛋白的抗體通過標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)印跡程序分析富集的蛋白質(zhì)群體。

 

產(chǎn)品用途包括

  • 調(diào)查瞬態(tài)監(jiān)管機(jī)制
  • 測量多種途徑成員蛋白的信號傳導(dǎo)事件 
  • 發(fā)現(xiàn)您感興趣的蛋白質(zhì)的新修改
  • 深入了解監(jiān)管機(jī)制
  • 測量內(nèi)源性或瞬時表達(dá)的蛋白質(zhì)信號傳導(dǎo)事件

?

 

套件內(nèi)容

SUMOylation 1試劑盒包含以下組分:

裂解和蛋白質(zhì)定量步驟IP和預(yù)清除步驟洗步驟洗脫步驟西部一步

 BlastR™裂解緩沖液 

 BlastR™稀釋緩沖液

 BlastR™過濾器

 蛋白酶抑制劑雞尾酒

 去SUMO化抑制劑雞尾酒

 Precision Red™蛋白質(zhì)分析試劑

 SUMOylation 1 Affinity Beads

 IP控制珠

 

 

 

 

 BlastR™洗滌緩沖液

 

 

 

 

 

 旋轉(zhuǎn)列

 珠子洗脫緩沖液

 

 

 

 

 化學(xué)發(fā)光試劑A.

 化學(xué)發(fā)光試劑B.

 抗SUMO1抗體

 

 

 

 

示例結(jié)果

這些套件有很多應(yīng)用,這里我們描述一個有趣的例子:

應(yīng)用1:研究重要的SUMOylation 1事件

與舊的SUMO1工具相比,使用Signal-Seeker™SUMOylation 1檢測試劑盒免疫沉淀總SUMO1譜

(A)使用BlastR裂解和過濾系統(tǒng)獲得HAP1野生型(WT)或SUMO1敲除(KO)裂解物。將1mg每種裂解物與40mg每種SUMO1親和試劑一起溫育:ASM11-珠(Cytoskeleton),21C7(Invitrogen純化的),21C7(DSHB-上清液),D11-珠(Santa Cruz)和綴合的SUMO1 IgG對照珠。 (CIG03)。用蛋白G瓊脂糖珠捕獲21C7抗體以富集SUMO-1修飾的蛋白。通過SDS-PAGE分離樣品并轉(zhuǎn)移至PVDF。使用1:5000的ASM01(Cytoskeleton)抗體和5%牛奶中1:1000的小鼠Trubelot Ultra-HRP二抗,通過蛋白質(zhì)印跡分析富集的SUMO1樣品。Trueblot secondary用于小化21C7樣品的重鏈和輕鏈檢測。 

 

(B):使用ASM11進(jìn)行IP,如圖1A所示。SUMO1修飾的蛋白質(zhì)用ASM01 1:5000顯示,抗小鼠以1:20,000顯示,以突出在64-30kDa范圍內(nèi)SUMO化蛋白質(zhì)的分布,當(dāng)使用未綴合的抗體時,可能被重鏈和輕鏈干擾掩蓋。 IP。

 

 

 

與舊的SUMO1工具相比,使用Signal-Seeker™SUMOylation 1檢測試劑盒免疫沉淀SUMO1修飾的靶蛋白

使用BlastR裂解和過濾系統(tǒng)獲得HAP1野生型(WT)或SUMO1敲除(KO)裂解物。1毫克每裂解物與40孵育 ASM11珠(細(xì)胞骨架),21C7(DSHB上清液),和共軛SUMO1 IgG對照珠(CIG03):g各自SUMO1親和試劑的。用蛋白G瓊脂糖珠捕獲21C7抗體以富集SUMO-1修飾的蛋白。通過SDS-PAGE分離樣品并轉(zhuǎn)移至PVDF。靶蛋白:通過蛋白質(zhì)印跡分析(A)TFII-I,RanGAP1和(B)schmd1的SUMO1修飾形式。抗兔-HRP標(biāo)記的第二抗體以1:10,000使用。所有三種一抗均為兔多克隆抗體,不應(yīng)結(jié)合來自IP抗體的重鏈和輕鏈片段。

在這一研究領(lǐng)域可以嘗試的其他實驗包括:

•參與調(diào)節(jié)靶蛋白的SUMOylating和去SUMOylating酶的藥理學(xué)研究。

•在各種不同的生長因子或藥物治療下研究SUMO化。

•檢查SUMOylated靶蛋白與其下游效應(yīng)子的相互作用。

•檢查SUMOylation 1和其他PTM之間對目標(biāo)蛋白的串?dāng)_。

 

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