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chimerx新產(chǎn)品NXT Taq PCR試劑盒

更新時(shí)間:2020-03-24      點(diǎn)擊次數(shù):914

 

chimerx新產(chǎn)品NXT Taq PCR試劑盒


CHIMERx現(xiàn)在提供了一個(gè)熱啟動(dòng)PCR試劑盒,旨在縮短PCR循環(huán)時(shí)間而又不影響產(chǎn)量或性能。NXT Taq PCR Kit包含現(xiàn)成的預(yù)混液,其中包括Hot Start NXT Taq DNA聚合酶,反應(yīng)緩沖液,MgCl2和dNTP。還包括無(wú)核酸酶的水和10X彩色加載溶液。NXT Taq PCR Kit可以與任何熱循環(huán)儀一起使用。

NXT Taq PCR試劑盒

chimerx 1108

 

$ 56.00

    快速概述

    熱啟動(dòng)PCR試劑盒,設(shè)計(jì)用于在任何熱循環(huán)儀上進(jìn)行快速循環(huán)PCR,而不會(huì)影響產(chǎn)量或性能

    細(xì)節(jié)

    提供的試劑

    NXT  Taq PCR預(yù)混液(2x)包含:

    • 熱啟動(dòng)NXT Taq DNA聚合酶 
    • 反應(yīng)緩沖液
    • 氯化鎂2
    • dNTPs

    水,無(wú)核酸酶的
    10X彩色溶液

    描述

    •  llows以獲得寬范圍的PCR產(chǎn)物的至多4個(gè)kb和從附加型或復(fù)雜的基因組DNA為10kb,分別
    • 即用型溶液,包含熱啟動(dòng)  NXT  Taq DNA聚合酶,反應(yīng)緩沖液,MgCl 2  和dNTP
    • 專(zhuān)為任何熱循環(huán)儀上的快速循環(huán)PCR設(shè)計(jì)
    • 縮短PCR循環(huán)時(shí)間而不會(huì)影響產(chǎn)量或PCR性能
    • 不需要重新設(shè)計(jì)引物
    • 隨附10X Color Load溶液,可直接在凝膠上加載PCR反應(yīng)
    • 在72°C下復(fù)制DNA,并在95°C下顯示40分鐘的半衰期
    • 包含5'→3'核酸外切酶活性
    • 缺乏3'→5'核酸外切酶活性
    • 在3'末端添加額外的“ A”
    • 抗Taq抗體在中等溫度下抑制聚合酶活性
    • 在初始變性步驟中,聚合酶活性得以恢復(fù)。

    應(yīng)用領(lǐng)域

    • Taq DNA聚合酶和抗Taq抗體之間形成復(fù)合物,構(gòu)成了熱啟動(dòng)PCR的基礎(chǔ),可方便地進(jìn)行室溫反應(yīng)。
    • 與常規(guī)PCR組裝方法相比,熱啟動(dòng)PCR可以提高PCR反應(yīng)的特異性,靈敏度和產(chǎn)率。

    筆記

    • 不要使用大于20μl的反應(yīng)體積,因?yàn)檫@會(huì)干擾獲得成功結(jié)果所需的宜溫度梯度
    • 使用前解凍,輕輕渦旋并短暫離心NXT Taq PCR Master Mix(2x),引物,DNA模板,以避免鹽濃度的局部差異
    • 退火和延伸步驟每100 bp分別需要5 s和3 s
    • 在室溫下設(shè)置PCR反應(yīng)
    • 底漆可以單獨(dú)添加,也可以作為預(yù)先準(zhǔn)備的底漆混合物添加
    • 渦旋樣品并短暫旋轉(zhuǎn)
    • 反應(yīng)可以在室溫下放入熱循環(huán)儀中
    • 使用10X Color Load Solution可使PCR反應(yīng)直接加載到凝膠上,而無(wú)需事先添加凝膠加載緩沖液。10X Color Load Solution包含凝膠加載試劑和兩種在電泳過(guò)程中分離的跟蹤染料(紅色染料和黃色染料)。在1%瓊脂糖凝膠中,紅色染料的遷移速率與600 bp DNA片段的遷移速率相同,而黃色染料的遷移速率高于20 bp。該染料不干擾大多數(shù)下游酶的應(yīng)用,但是建議在酶操作之前純化PCR產(chǎn)物。
    • 在大多數(shù)情況下,無(wú)需在PCR反應(yīng)中添加添加劑。對(duì)于某些困難的目標(biāo),例如:富含GC的序列,可以添加具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)添加劑的序列(例如DMSO)以改善擴(kuò)增。使用濃度為2-8%的DMSO。如果需要,建議的起始DMSO濃度為3%
    • 作為使用多少模板DNA的一般指南,請(qǐng)從少10 4  個(gè)目標(biāo)序列拷貝開(kāi)始,以25-35個(gè)周期獲得信號(hào)(即1μg1 kb ds DNA等于9.1 x 10 11分子,1μg的大腸桿菌基因組DNA等于2 x 10 8分子,1μg人基因組DNA等于3 x 10 5分子)

    儲(chǔ)存條件

    在-20°C下儲(chǔ)存
    產(chǎn)品在干冰上運(yùn)輸

    分類(lèi)目錄

    聚合酶,嗜熱DNA聚合酶

     

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