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abbexa abx251458說明書

更新時間:2020-06-12      點擊次數:1129

 

abbexa abx251458說明書

人催乳素誘導蛋白(PIP)ELISA試劑盒

貨號 abx251458

 

人催乳素誘導蛋白ELISA試劑盒是針對人催乳素誘導蛋白(PIP)的ELISA試劑盒。 
 

目標催乳素誘導蛋白
反應性人的
經過測試的應用ELISA法
建議稀釋宜稀釋度/濃度應由終用戶確定。
存儲裝運溫度為4°C。收到后,按照試劑盒手冊中的存放說明存放試劑盒。
有效期該套件的有效期為6個月。
穩定性試劑盒的穩定性取決于活性喪失的速率。在適當的存儲條件下,有效期內的丟失率小于5%。為了大程度地降低性能波動,應嚴格控制操作程序和實驗室條件。還強烈建議整個測試始終由同一用戶執行。
UniProt主ACP12273(UniProt, ExPASy
UniProt次級ACA0A963,A0A9C3,A0A9F3,A4D2I1
UniProt條目名稱PIP_HUMAN
基因符號畫中畫
凱格hsa:5304
9606.ENSP00000291009
測試范圍31.2 pg / ml-2000 pg / ml
標準格式凍干
ELISA檢測比色法
ELISA類型三明治
ELISA數據定量的
樣品類型血清,血漿和其他生物液體。
測定原理該試劑盒基于三明治酶聯免疫吸附測定技術。將抗體預包被到96孔板上。將標準品,測試樣品和生物素偶聯試劑添加到孔中并孵育。然后加入結合了HRP的試劑,并孵育整個平板。在每個階段使用洗滌緩沖液去除未結合的結合物。TMB底物用于定量HRP酶促反應。添加TMB底物后,只有包含足夠PIP的孔才會產生藍色產物,然后在加入酸性終止液后變為黃色。黃色的強度與板上的PIP量成正比。在酶標儀中于450 nm處用分光光度法測量光密度(OD),由此可計算出PIP的濃度。
套件組件
  • 預涂96孔微孔板
  • 標準
  • 標準稀釋液
  • 洗滌緩沖液
  • 檢測試劑A
  • 檢測試劑B
  • 稀釋劑A
  • 稀釋劑B
  • TMB基板
  • 停止解決方案
  • 封口機
必需但未提供的材料
  • 37°C恒溫箱
  • 多通道和單通道移液器以及無菌移液器吸頭
  • 噴瓶或自動微孔板清洗機
  • 1.5毫升管
  • 蒸餾水
  • 吸收性濾紙
  • 100毫升和1升量筒
  • 酶標儀(波長:450 nm)
  • ELISA搖床
樣品收集/準備
  • 血清:應將樣品收集到血清分離管中。在4°C或室溫下放置長達60分鐘,使管子在垂直位置靜置過夜,以凝結血清。以約1000×g的速度離心20分鐘。立即分析血清或等分試樣并儲存在-20°C或-80°C下。
  • 血漿:使用肝素或EDTA作為抗凝劑收集血漿。收集30分鐘內以1000×g離心15分鐘。立即測定或分裝并保存在-20°C或-80°C下。避免溶血和高膽固醇樣品。
  • 組織勻漿:組織勻漿的制備取決于組織類型-這僅是示例。用冰冷的PBS沖洗組織以去除多余的血液。均質前稱重。切碎組織,用組織勻漿器在PBS中的冰上勻漿并超聲處理細胞懸液。將勻漿以5000×g離心5分鐘,收集上清液。立即測定或等分試樣并在-20°C儲存。
試劑準備
  • 1)標準液:用推薦體積的標準稀釋液配制標準液,制成標準溶液。然后按照協議中的說明,使用標準稀釋劑緩沖液對標準溶液進行系列稀釋。
  • 2)洗滌緩沖液:按照協議中的說明,用蒸餾水稀釋濃縮的洗滌緩沖液。
  • 3)檢測試劑制備:計算所需工作溶液的總體積。用稀釋劑A和稀釋劑B分別以1:100稀釋檢測試劑A和檢測試劑B。
測定步驟
  • 1)設置標準品,測試樣品和對照孔。
  • 2)將100μl稀釋的標準液分裝到標準孔中。
  • 3)將100μl標準稀釋緩沖液等分到對照(零)孔中。
  • 4)將100μl稀釋的樣品等分到樣品孔中。在37°C下孵育1小時。
  • 5)將100μl檢測試劑A分裝到每個孔中。在37°C下孵育1小時。
  • 6)洗3次。
  • 7)將100μl檢測試劑B分裝到每個孔中。在37°C下孵育30分鐘。
  • 8)洗5次。
  • 9)將90μlTMB底物等分到每個孔中。在37°C下孵育10-20分鐘。
  • 10)等分50μl終止溶液。
  • 11)在450 nm下測量OD。
協議
  • 使用前,將試劑盒的組分和樣品平衡至室溫(18-25°C)。建議為每個測試繪制標準曲線。
  • 1.分別在預涂板上設置標準,測試樣品和對照(零)孔,然后記錄其位置。建議測量每個標準品和樣品至少一式兩份。
  • 2.將100 µL的每種標準品,對照和樣品加到適當的孔中。用蓋密封板并在37°C孵育1小時。
  • 3.取下蓋子并丟棄液體。
  • 4.向每個孔中添加100μl檢測試劑A工作溶液。用蓋密封板并在37°C孵育1小時。
  • 5.取下蓋子并丟棄溶液。用1X Wash Buffer洗滌板3次。
  • 6.將100 µL檢測試劑B工作溶液添加到每個孔中,密封并在37°C孵育30分鐘。
  • 7.棄去溶液并按照上一步中的說明用洗滌緩沖液洗滌板5次。
  • 8.將90μlTMB底物等分到每個孔中。用蓋密封板并在37°C下孵育10-20分鐘。避免暴露在光線下。孵育時間僅供參考,宜時間應由用戶確定。請勿超過30分鐘。
  • 9.向每個孔中添加50 µL終止溶液。立即在450 nm處讀取。
結果計算為了進行計算,請對每個參考標準品和每個樣品的OD450重復讀數取平均值,然后減去平均對照(零)OD450讀數。可以將標準曲線繪制為每種參考標準溶液(Y)的相對OD450與每種標準溶液(X)的各自濃度的關系。可以從標準曲線內插樣品的PIP濃度。
可用性在5-12個工作日內發貨。
注意本產品僅供研究使用。

 

范圍和靈敏度可能會發生變化。
請注意,我們的ELISA和CLIA試劑盒針對檢測天然樣品(而非重組蛋白)進行了優化。我們無法保證檢測到重組蛋白,因為它們與天然蛋白可能具有不同的序列或三級結構。

 

 

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