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KANEKA KanCapA™ 抗體純化樹脂-上海起發

更新時間:2021-01-29      點擊次數:1700

KANEKA KanCapA™ 抗體純化樹脂-上海起發

 

抗體純化樹脂? -富士膠片和光

KANEKA KanCapA™

 

   

  

  本產品為Protein A親和層析樹脂。用于從活體樣本及細胞培養上清.純化免疫球蛋白及包含Fc段的重組抗體。

  本產品由高交聯纖維素微珠及新研發的耐堿Protein A配體構成,可用于IgG的親和純化。

 

 

◆特點

 

  • 耐堿

  • 良好洗脫條件

  • 高抗體結合能力

  • 可循環使用

  • 便于擴增

 

 

◆關于改良Protein A

 

  

  KanCapA™采用的不是天然Protein A,而是使用變異型C域5聚物的新型Protein A。

  天然Protein A的C域結合于Fc段,也結合于Fab段,其中與VH3亞家族抗體的反應性較高。該類型的解離需要弱酸條件下洗脫。

  為改善該問題,使用分子設計系統重新設計分子,研發了保持耐堿性、改善Fab段的非特異性結合及洗脫曲線的Protein A。

 

 

本產品采用的Protein A

 

1.C5聚體蛋白質

搜狗截圖20160727141313.png

良好pH條件下清晰地洗脫抗體 

2.較高的耐堿性

3.減少Fab段的非特異性結合

 

 

◆產品特性

 

KANEKA KanCapA™ 產品特性

 

矩陣

高交聯纖維

 ※

 1) 平均粒度為累積體積分布的中間粒度

 2) 5%動態結合容量為前端分析測定(停留時間3分鐘)

 3) 可在強堿條件下清洗,但請避免長時間的清洗

 4) 請勿冷凍

平均粒度1)

65-85μm

配體

Protein A,重組(抗強堿)

結合

化學結合(還原胺化)

動態結合容量2)

≧35mg 人多克隆IgG/mL載體

化學穩定性3)

使用親和層析通用可溶性溶媒時較穩定

pH范圍3)

pH 2-13

靜止清洗條件3)

0.1-0.5 mol/L氫氧化鈉
6-8 mol/L尿素、6 mol/L鹽酸胍

流量

大500cm/h(層高: 20-25cm)

停留時間

≧3分鐘(建議:4-6分鐘)

保存條件4)

20%乙醇渾濁液,1~10℃

 

 

◆應用

 

1、Fab段純化應用

 

 • 利用KANEKA KanCapA™的特點,可從經木瓜蛋白酶處理后的IgG溶液分餾Fc段及Fab段。

 

3-.jpg

 

 

2、IgG洗脫曲線(pH3.5 & pH3.0)

 

 • 洗脫范圍已優化,可清晰地分餾提純。

 

4-.jpg

 

 

 

3、通過強堿清洗進行樹脂循環

 

 • 進行300次循環處理后(0.1M氫氧化鈉溶液,15分鐘),IgG的結合容量的減少率仍低于20%,表明其循環性能較高。

 

5-.jpg6-.jpg

 

使用0.1 M氫氧化鈉溶液進行循環處理后的IgG結合活性曲線數據

循環處理后(0.1M氫氧化鈉溶液 15分鐘)的IgG回收率及ProteinA配體的滲濾量的曲線數據 

 

 

4、動態結合容量 曲線數據

 

 • 在4-6分鐘停留時間過程中,DBC較高。

  ※ 動態結合容量表示純化樣本在流動的狀態下,回收程度的數值。動態結合容量較高的載體的流速較快,可回收大量目標分子,因此可以認為在短時間內有效純化目標分子的優質載體。

 

7-.jpg

       KANEKA KanCapA™的Dynamic Binding Capacity (DBC; 動態結合容量) 曲線數據

 

 

5、不同大小的樹脂填充裝柱的壓力/流速繪圖數據

 

8-.jpg

                填充依賴壓力的計算方法是從整體壓力減去系統壓力。

 

 

6、KANEKA KanCapA™于各種大小的柱的填充效果

 

  • KANEKA KanCapA™適用于各種大小的柱。

 

充填方法

L. D.(厘米)

高度(毫米)

培養皿/米

非對稱性

流動填充

4.4

200

5710

1.14

軸向力填充

7

199

6063

1.06

流動填充

10

201

5276

1.18

流動填充

30

200

5208

1.17

軸向力填充

45

233

4712

1.09

 

以下是脈沖注入數據:

  可溶性溶媒:1(v/v)% 丙酮

  注入量:1% 柱容量

  流速:60 cm/h

 

 

◆產品列表

 

產品編號產品名稱規格
114-01071KANEKA KanCapA™2mL (net 1mL)
110-0107310mL (net 5mL)
118-0107450mL (net 25mL)
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