optigene GspSSD2.0 等溫 Mastermix說(shuō)明書(shū)

GspSSD2.0 等溫 Mastermix (ISO-004)

等溫解決方案

• 快的 LAMP 和 RT-LAMP 主混音。

 

• OptiGene 的工程預(yù)混液可實(shí)現(xiàn) DNA 和 RNA 的最快等溫?cái)U(kuò)增。

 

• 包含我們專(zhuān)有的新型 GspSSD LF DNA 聚合酶；通過(guò) in-silico 設(shè)計(jì)進(jìn)一步設(shè)計(jì)。

 

• 天然逆轉(zhuǎn)錄酶活性可實(shí)現(xiàn)快速單酶 RT-LAMP。

OptiGene 的等溫預(yù)混液提供 DNA 擴(kuò)增速度


OptiGene 的等溫預(yù)混液（ISO-001 和 ISO-004）與 NEB 的 WarmStart LAMP 試劑盒（DNA 和 RNA）進(jìn)行了比較

從人類(lèi) gDNA (Sigma) 擴(kuò)增 DNA 靶標(biāo) (VKORC1)。25μl LAMP 反應(yīng)在 65oC 下在實(shí)時(shí)熱循環(huán)儀 (Roche LC-480) 上進(jìn)行 60 分鐘，一式兩份。“產(chǎn)生結(jié)果的時(shí)間"定義為擴(kuò)增熒光值達(dá)到最大熒光 10% 的閾值的時(shí)間。

使用 LAMPDesigner® 設(shè)計(jì)了靶向 VKORC1 基因的 LAMP 引物。
達(dá)到0.8um FIP - CTGTTGCACCTACCCTTCTGGAGCAGGAGAGGGAAATATCA
達(dá)到0.8um BIP - GAAGTCAAGCAAGAGAAGACCTGAAAACTCCTGACCTCAAGTGA
0.2微米F3 - ACCATTATTCTGTCTACCACAC
0.2微米B3 - GACAGGGTTTCACCATGTT
0.4微米LoopF - TCTCTTCCTCTGGCGTCT
0.4微米LoopB - CTCACGCCTATAATCCTAGCATT

時(shí)相比，OptiGene的等溫主要混合物（ISO 001和ISO-004）表現(xiàn)出更快的DNA檢測(cè)NEB 主混音。

OptiGene 的等溫預(yù)混液提供RNA 擴(kuò)增速度

OptiGene 的等溫預(yù)混液（ISO-001 和 ISO-004）與 NEB 的 WarmStart LAMP 試劑盒（DNA 和 RNA）[Lot:0021609] 進(jìn)行了比較。ISO-001 和 ISO-004 不含特定的逆轉(zhuǎn)錄酶 (RT)。為了與 NEB 混合物（包含單獨(dú)和特定的逆轉(zhuǎn)錄酶）進(jìn)行真正的比較，將 0.5U AMV-RT 添加到 OptiGene Master Mix 反應(yīng)（ISO-001 inc. RT 和 ISO-004 inc. RT）中。還比較了標(biāo)準(zhǔn) ISO-001 和 ISO-004 RT-LAMP 反應(yīng)，以顯示混合物具有優(yōu)異的固有逆轉(zhuǎn)錄酶活性。

從人總 RNA (Ambion) 中擴(kuò)增 RNA 靶標(biāo) (β-肌動(dòng)蛋白)。25μl RT-LAMP 反應(yīng)在 65oC 下在實(shí)時(shí)熱循環(huán)儀 (Roche LC-480) 上進(jìn)行 60 分鐘，一式兩份。“產(chǎn)生結(jié)果的時(shí)間"定義為擴(kuò)增熒光值達(dá)到最大熒光 10% 的閾值的時(shí)間。

使用 LAMPDesigner® 設(shè)計(jì)了靶向 Beta-actin 基因的 LAMP 引物。
0.8uM FIP – GAGCCACACGCAGCTCATTGTACACGGCATCGTCACCAAC
0.8uM BIP – CTGAACCCCAAGGCCAACCGGCTGGGGTGTTGAAGGTC
0.2uM F3 – CCCTGAAGTACCCCATCGA
0.2uM B3 – ACAGCCTGGATAGCAACGT
0.4uM LoopF – GCCAGATTTTCTCCATGTCGTC
0.4uM LoopB – CGAG

OptiGene 的等溫預(yù)混液（ISO-001 和 ISO-004）在 RT-LAMP 中顯示出速度。

ISO-004 的擴(kuò)增速度比 NEB 混合物快 2 倍，如果添加特定的 RT 酶進(jìn)行同類(lèi)比較，則快近 3 倍。

主要特征：

• 最快的 DNA 和 RNA 擴(kuò)增。

 

• *的鏈置換活性

 

• 65oC 最佳溫度

 

• 5'-3' 外切酶減

 

• 3'-5' 外切酶減

 

貨號(hào)：	描述
ISO-004	GspSSD2.0 等溫預(yù)混液 - 300 次反應(yīng)
ISO-004LNL	GspSSD2.0 Lyse'n'LAMP 等溫預(yù)混液 - 300 次反應(yīng)
ISO-004nd	GspSSD2.0 等溫預(yù)混液 - 300 次反應(yīng) - 無(wú)染料
ISO-004nm	GspSSD2.0 等溫預(yù)混液 - 300 次反應(yīng) - 無(wú) Mg
ISO-DR004	GspSSD2.0 等溫預(yù)混液 - 干燥試劑 300 次反應(yīng)
ISO-DR004-RT100	快速等溫逆轉(zhuǎn)錄酶預(yù)混液 - 干燥試劑 - 10 x 10 反應(yīng)
ISO-DR004-RT300	快速等溫逆轉(zhuǎn)錄酶預(yù)混液 - 干燥試劑 - 6 x 50 次反應(yīng)
ISO-004-RT300	快速等溫逆轉(zhuǎn)錄酶預(yù)混液 - 濕試劑 - 6 x 50 反應(yīng)