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POLYSCIENCES 21759-1說明書

更新時間:2018-08-29      點擊次數(shù):10215

 

美國POLYSCIENCES公司成立于1961年,主要生產(chǎn)和經(jīng)營LIFE SCIENCES生命科學(膠體金,不含甲醛的甲醇等),病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產(chǎn)品。polysciences公司是世界上較大較全的多聚化合物供應商,同時是的免疫學,組織化學試劑耗材供應商.

  POLYSCIENCES   21759-1現(xiàn)貨

Nylon Wool Fiber T細胞分離尼龍毛柱

產(chǎn)品簡介】

 尼龍毛柱是免疫學中一種用于分離T細胞的分離柱。憂郁在研究體內(nèi)及體外的免疫系統(tǒng)時,分離淋巴細胞群是一個關鍵步驟。

描述

尼龍羊毛纖維可用于從外周血中分離白細胞并從B細胞中分離T細胞。粒細胞和B細胞粘附在纖維上,而T細胞和其他細胞則不粘。

準備使用,在10cc注射器中使用500mg預包裝尼龍羊毛纖維。

10cc預裝注射器Gamma處理25.0 - 40.0 kGy。

危害: 

無害使用正常預防措施

處理: 

運動正常護理

存儲: 

在室溫下儲存

【詳細說明】

 

尼龍毛柱

 

  尼龍毛柱是免疫學中一種用于分離T細胞的分離柱。憂郁在研究體內(nèi)及體外的免疫系統(tǒng)時,分離淋巴細胞群是一個關鍵步驟。而市場上并沒有針對B細胞的特異性抗血清,所以分離淋巴細胞中的T細胞并不是十分方便。T細胞尼龍毛分離法利用了尼龍毛對B細胞的親和力,從而使T細胞在沒有嚴重損傷的情況下達到的足夠的純度。該方法不像流式和磁珠費用昂貴,而且操作簡便,所需要的條件也不高,是一種非常實用的方法。

 

  操作方法:

 

  1.秤取1.5g尼龍毛裝入20-30ml玻璃容器或注射器內(nèi),填料的體積控制在15毫升左右。因為尼龍毛的松緊關系到T細胞的回收率,所以要特別注意。注射器下端配接5厘米左右長的帶有彈簧夾的橡皮管。

 

  2. 加入大量的PBS平衡柱子后,用鋁箔包裹,并置于適當?shù)娜萜鲀?nèi),高壓滅菌15分鐘。

 

  (商品化尼龍毛柱以上步驟可以省略,經(jīng)過PBS平衡后可以直接進行下列步驟。)

 

  3. 滅菌的尼龍毛柱垂直固定后放于超凈臺內(nèi),頂部以鋁箔覆蓋,避免污染。

 

  4. 注射器下端,橡皮管,彈簧夾用*消毒。打開彈簧夾調節(jié)流速在大約3-4ml/min。

 

  5.首先,加入3-4倍柱體的無血培養(yǎng)基平衡,之后加入相同體積的含有血清的培養(yǎng)基平衡(上述培養(yǎng)基都要預熱),zui后等培養(yǎng)基液面接近柱填料液面時,關閉彈簧夾。

 

  6. 樣本細胞懸浮液濃度控制在約5×108cells/ml,上樣量一般是1/3-1/5柱體積。樣品加入之后,再加入少量培養(yǎng)液,然后關閉彈簧夾。

 

  7.覆蓋鋁箔,垂直固定,置于消毒過的容器中,于培養(yǎng)箱內(nèi)37℃孵育1小時。此過程中柱子必須要保持垂直狀態(tài)。

 

  8. 從培養(yǎng)箱中拿出柱子,置于超凈臺內(nèi),除去鋁箔。接上按照4.中的方法消毒的彈簧夾和橡皮管,加入適當體積經(jīng)37℃預熱的培養(yǎng)基,打開彈簧夾控制流速在3-4 mL/min,流出約5ml之后,流出的培養(yǎng)液基變得不透明,此時其中含有T細胞,收集這一部分培養(yǎng)基。

 

  9. 基本上何時結束收集取決于流出液體中細胞的濃度,實際上,收集的量達到一個柱體積時就可以停止收集,因為即使收集更多的量,回收率幾乎不會增加。

 

  10.上述操作后,細胞的

 

  回收率為: 15~20 %

 

  T細胞含量: 85~95 %

 

  B細胞污染率: 1 5 %

 

  多數(shù)細胞被確定為T細胞。

 

(注)收集粘附于尼龍毛上的細胞時,將T細胞收集完畢后的尼龍毛再無菌操作的狀態(tài)下取出,轉移到適當?shù)娜萜髦校描囎有⌒牡膶⒛猃埫砷_,粘附的細胞可以洗到培養(yǎng)基中。或者將注射器芯插入注射器內(nèi),通過壓力使的粘附的細胞隨著液體流出。

 

訂貨信息

貨號

品名

包裝

品牌

18369-50

尼龍毛

50g

POLYSCIENCES

18369-10

尼龍毛

10g

POLYSCIENCES

21759-1

尼龍毛柱 預裝好

10支

POLYSCIENCES

 

 

 

 

 

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